中国典型培养物保藏中心（CCTCC）细胞库现已新增A549和HCT116的基因敲除KO细胞共5380株，可敲除的靶基因位点达2690个。

  基因敲除细胞系构建是一种利用基因编辑技术将特定基因从细胞系中删除的方法。通过这种方法，可以研究该基因在细胞中的功能和作用机制。

  CCTCC采用国际先进的Cas9 RNP方法进行基因敲除细胞系构建，相较于质粒和慢病毒构建的方法优势显著：

  1. 无DNA干扰：能够避免非预期的基因片段插入，确保基因的稳定性；

  2. 无免疫反应干扰：完全排除了可能影响宿主细胞的因素，提高了实验的准确性；

  3. 转染效率高：特别适用于质粒转染效率低的宿主细胞，如难以转染的干细胞、免疫细胞，以及原代细胞等；

  4. 简便快捷：该技术无需转录表达与降解质粒，大大缩短了实验周期，比传统方法快1-2个月；

  5. 提高编辑效率：Cas9蛋白与sgRNA结合效率高且稳定，可以提高基因编辑的效率；

  6. 降低脱靶效应：Cas9蛋白与sgRNA非持续表达且可降解，从而减少了脱靶效应；

  总体而言，RNP技术在提高实验效率和准确性的同时，也大大缩短了实验周期，具有很高的应用价值。

   欢迎咨询！（cctcccell@whu.edu.cn）

（注：A549和HCT116 KO细胞的2690个靶基因敲除位点如下表所示）